服務(wù)熱線
15201163601
產(chǎn)品展示PRODUCTS
5月-7月疫情期間,北京華新康信生物科技有限公司幾百種代理品牌進行產(chǎn)品*活動,大力讓利新老客戶,保質(zhì)保量,歡迎咨詢。ProteintechProteintech北京代理 Proteintech華北代理,Proteintech華東代理,Proteintech華南代理, Proteintech華中代理,Proteintech代理,Proteintech 代理,Proteintech代理 北京華新康信生物科技有限公司 Proteintech產(chǎn)品,Proteintech現(xiàn)貨,Proteintech各系列產(chǎn)品,Proteintech知識介紹,Proteintech技術(shù)服務(wù),Proteintech咨詢服務(wù),Proteintech合作服務(wù),歡迎電聯(lián),真誠合作,合作共贏。
產(chǎn)品種類齊全,北京華新康信與國外諸多生命科學(xué)領(lǐng)域*合作眾多,代理品牌Glycan Therapeutics,Intact Genomics,Integral Molecular,Medkoo,Niomech,Terragene,Anshlabs wako,EZbioscience,CMCTAG,Anatrance ,F(xiàn)avorage ,Affinity,Advanced biomatrix,bioplastics,天地人和,TRC,凱杰,義翹,sciencell;價格優(yōu)勢品牌:seracare,Streck,Toxin,Zeptometrix,sigma,F(xiàn)orteBio,CanSyn,polyplus,santa,chormsystems,bethyl ,moltox, permagenlabware ,bioflux,Bio-Rad, coriell, listlabs, ZYMO , ABclonal , EY laboratories ,greatcellsolar , agdia , beckman , Bioxcell,,biomax ,usascientific , TRC ,nist ,americanelements,cayman , Fisher ,thermofisher , nanopore, 日立, 三菱株式會社 ,RD, takara等,緊跟生命科學(xué)的發(fā)展,不斷滿足客戶的需求,為各位的科研之路上添磚加瓦!
產(chǎn)品貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 品牌 |
11422-1-AP | Marcksl Antibody | Proteintech |
10934-1-ap | Cyclin D2 Antibody | proteintech |
10586-1-AP | STMN2 Antibody | proteintech |
MARCKSL1抗體1出版物
兔多克隆| 貨號:11422-1-AP
物種特異性:人類,老鼠
在以下位置檢測到正白平衡:人腦組織
在以下方面檢測到陽性IHC:人肺癌組織,人肝癌組織,人胰腺癌組織
注意:建議使用pH 9.0的TE緩沖液進行抗原回收;(*)或者,可以用pH 6.0的檸檬酸鹽緩沖液進行抗原修復(fù)
推薦稀釋度:
白平衡:1:500-1:1000
IHC:1:20-1:200
取決于樣品,在“驗證”選項卡中檢查數(shù)據(jù)
產(chǎn)品信息:
資源:兔子
純化方法:抗原親和純化
同型:IgG抗體
存儲:具有0.1%疊氮化na和50%甘油pH 7.3的PBS。儲存于-20 Ô C. 等分是不必要的-20 ö下儲存。
免疫原信息:
免疫原MARCKSL1融合蛋白Ag1967
全名:類馬克1
計算分子量:195aa,20 kDa
觀察分子量:48 kDa的
GenBank登錄號:BC007904
基因編號(NCBI):65108
基因符號MARCKSL1
同義字F52,Mac MARCKS,MACMARCKS,MARCKS like 1,MARCKS like protein 1,MARCKS related protein,MARCKSL1,MLP,MLP1,MRP
背景 :
MARCKS樣蛋白1(MARCKSL1)在神經(jīng)組織中廣泛表達,也稱為MARCKS樣蛋白(MLP)或MARCKS相關(guān)蛋白(MRP),屬于MARCKS家族,它是PKC的高酸性豆蔻酰化家族底物廣泛分布在包括巨噬細胞在內(nèi)的各種細胞類型中。由于SDS凝膠上的異常遷移或磷酸化,該蛋白質(zhì)的計算分子量為20 kDa,表觀分子量為42-48 kDa。MARCKSL1的遺傳破壞導(dǎo)致神經(jīng)管閉合缺陷,依賴于肌動蛋白功能,細胞形狀和細胞遷移的協(xié)調(diào)控制的事件。人們認為MARCKSL1調(diào)節(jié)肌動蛋白的細胞骨架,從而參與主要的細胞反應(yīng),例如吞噬作用,分泌,運動,有絲分裂和膜運輸。
免疫印跡和免疫沉淀方案:
細胞裂解液的制備:
將RIPA緩沖液添加到細胞中(100μL放入35 mm皿中,200μL放入60 mm皿中,500μL加入100毫米培養(yǎng)皿),同時將培養(yǎng)皿置于冰上。刮擦細胞并輕輕搖動懸吊在冷藏室中的搖桿或定軌振動器上15分鐘裂解細胞。用浴超聲儀在冰水中超聲處理,直樣品不再粘稠。在4℃下以12000 g的速度離心細胞5分鐘以去除沉淀。移動上清液換一個新鮮的管。細胞裂解物的終濃度將為2-3μg/μL。對于白平衡,添加4×SDS檔緩沖裂解液1×SDS終濃度。
免疫印跡:
1.煮沸10分鐘后,將20-50μL樣品上樣SDS PAGE。對于大多數(shù)蛋白質(zhì),建議每泳道上樣量使用30-80μg總裂解物蛋白質(zhì),因為細胞中80%的蛋白質(zhì)種類的濃度非常低。
2.將凝膠浸入蛋白質(zhì)印跡轉(zhuǎn)移緩沖液中。大多數(shù)情況下建議使用PVDF膜蛋白質(zhì)。將膜浸入甲醇中1-2分鐘,然后將膜浸入轉(zhuǎn)移緩沖液10分鐘,然后將其放在厚厚的緩沖液濾紙疊上。然后用另一疊浸有緩沖液的濾紙覆蓋它。掩蓋轉(zhuǎn)移儀器。凝膠應(yīng)在膜的負極。
3.以1 mA / cm2的電流運行90分鐘。
4.將膜在封閉緩沖液中于室溫下孵育1小時或過夜在4℃。用洗滌緩沖液洗滌膜3×5分鐘。
5.用封閉緩沖液稀釋一抗。在37℃下孵育膜1.5小時室內(nèi)溫度。用洗滌緩沖液洗滌膜3×5分鐘。
6.用封閉緩沖液稀釋二抗。在37℃下孵育膜1小時室內(nèi)溫度。用洗滌緩沖液洗滌膜3×5分鐘。
7.用洗滌緩沖液洗滌膜3×10分鐘。
8.用ECL顯色。
免疫沉淀:
1.將200-350μL細胞裂解液(包含1-3 mg總蛋白)轉(zhuǎn)移到微量離心管中。
2.向細胞(或預(yù)先清除的)裂解物中添加150-300μL孵育緩沖液和1-4μg一抗。jia抗體濃度應(yīng)通過滴定確定。用對照IgG建立陰性對照實驗(對應(yīng)于原發(fā)性抗體來源)。輕輕搖動在4℃下孵育2-4小時或過夜。
3.加入50μLProtein A或G Sepharose微珠漿液以捕獲免疫復(fù)合物。將混合物在4℃輕輕搖動1-4小時。
4.取下端蓋,從旋轉(zhuǎn)柱底部釋放上清液。必要時,重懸磁珠混合物以提高流速。
5.用含1x蛋白酶抑制劑的1x TBST將珠子洗滌5次。后之后洗滌,將旋轉(zhuǎn)柱在4℃下于500 g離心30秒,然后收集上清液并丟棄。
6.將離心柱放在新的微量離心管中,合并洗脫液。洗脫沉淀用40μl洗脫緩沖液在4℃下于8000-10000g離心1分鐘,重復(fù)一次用新的40μl洗脫緩沖液洗脫。
7.在洗脫液中加入10μl堿中和緩沖液和30μl4×樣品緩沖液,在95-100℃5分鐘。將其保存在-20℃或在SDS-PAGE上加載20-40μl,并通過WB。
組織培養(yǎng)細胞免疫熒光的協(xié)議:
1.在小的圓形玻璃蓋上培養(yǎng)細胞。
2.用4%PFA或有機溶劑在4℃固定細胞20分鐘(如果您使用固定的有機溶劑,則只需跳過第3步,然后直接進行第4步)。
3.將玻璃杯準(zhǔn)確轉(zhuǎn)移5分鐘0.2%Ttiton X-100-PBS中。
4.在室溫下用BSA-PBS封閉細胞1h,或在4℃下過夜。
5.在蓋玻片上加入50μL特異性一抗,并在室溫下孵育1小時在潮濕的容器中加熱溫度。用PBS清洗蓋板三遍。
6.在每個蓋玻片上加入50μL熒光標(biāo)記的第二抗體,并在黑暗中于潮濕的容器中于室溫下孵育1小時。
7.將蓋玻片安裝在15%的甘油中或少量載玻片上。
8.用指甲油在邊緣上密封蓋玻片。
石蠟包埋的組織切片的免疫組織化學(xué)方案:
1.在2種二甲苯中對載玻片進行脫蠟處理,一次40分鐘,另一次20分鐘。
2.將玻片轉(zhuǎn)移到100%酒精,95%酒精,80%酒精,60%酒精和ddH2O中每次5分鐘。
3.將載玻片放在裝有抗原回收緩沖液的容器中,并在中間放置微波以進行操作。幾分鐘(700 W烤箱),讓回收溶液在室溫下冷卻。
4.用TBS沖洗2×5分鐘。
5.通過在3%H2O2溶液中孵育切片來阻斷內(nèi)源性過氧化物酶活性ddH2O 10分鐘。
6.用TBS沖洗2×5分鐘。
7.在室溫下在TBS中封閉5-10%的山羊血清30分鐘。
8.排干幻燈片幾秒鐘(請勿沖洗)并擦拭圓形部分。
9.應(yīng)用在TBS中組成的一抗。在室溫或4℃下孵育1小時過夜。
10.用TBST沖洗2×5分鐘。
11.在室溫下應(yīng)用Envision二抗30分鐘。
12.用TBS沖洗2×5分鐘。
13.在室溫下用發(fā)色團(DAB)顯影,在顯微鏡下觀察。
14.用自來水沖洗5分鐘。
15.在市長的蘇木浴中復(fù)染30-60秒。
16.在水浴中洗7-8次,然后自來水3分鐘。
17.用60%,80%,95%和100%的酒精分別脫水5分鐘。
18.轉(zhuǎn)移到二甲苯中5分鐘。通風(fēng)30分鐘。
19.安裝
5月-7月疫情期間,北京華新康信生物科技有限公司進行產(chǎn)品大力讓利活動,代理Proteintech品牌。北京華新康信生物科技有限公司是 Proteintech品牌代理商。北京華新康信專業(yè)代理各大產(chǎn)品,系列齊全,大部分現(xiàn)貨,保證質(zhì)量,真誠合作,歡迎您咨詢,我們將竭盡全力滿足您的需求。選購Proteintech代理,您選北京華新康信生物科技有限公司,北京華新康信生物科技有限公司專業(yè)代理Proteintech品牌,Proteintech代理 北京華新康信生物科技有限公司是(Proteintech)(Proteintech代理)(Proteintech專業(yè)代理)(Proteintech北京代理)(Proteintech上海代理)(Proteintech代理),歡迎電話咨詢,我們的產(chǎn)品,將會給您帶來意想不到的成效,歡迎電話咨詢,合作共贏。