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細(xì)胞系轉(zhuǎn)染
細(xì)胞系可以用 Celetrix 電穿孔以非常高的效率和非常高的細(xì)胞活力進(jìn)行轉(zhuǎn)染。例如,Jurkat 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率可達(dá) 90% 以上,細(xì)胞保持快速生長(zhǎng)。
原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染
Celetrix 電穿孔技術(shù)可以以非常高的效率對(duì)原代細(xì)胞進(jìn)行電穿孔。例如,人PBMC用GFP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染效率為64%,CAR-T2A-GFP用SB轉(zhuǎn)座子轉(zhuǎn)染效率可達(dá)60-90%。 人iPSC電穿孔效率可達(dá)80%以上,細(xì)胞保持未分化。與市場(chǎng)上的所有其他電穿孔方法相比,Celetrix 的效率高。
Celetrix TM密封管
1. 毛細(xì)管電穿孔的局限性
毛細(xì)管壁是絕緣體。當(dāng)細(xì)胞非常靠近毛細(xì)血管壁時(shí),細(xì)胞和毛細(xì)血管壁之間就會(huì)形成一條狹窄的通道,供電流通過(guò)。由于液體電阻與橫截面積成反比,因此為該狹窄通道分配了更高的電壓。細(xì)胞上的有效電穿孔表面也增加了。毛細(xì)管效應(yīng) (CE) 可以在非毛細(xì)管溶液中通過(guò)將細(xì)胞置于高濃度下類似地實(shí)現(xiàn),從而使它們成為彼此的下一個(gè)絕緣體。
毛細(xì)管效應(yīng)對(duì)細(xì)胞與毛細(xì)管壁之間的距離非常敏感。當(dāng)細(xì)胞非常靠近毛細(xì)血管壁 ( ) 時(shí),毛細(xì)管效應(yīng) (CE) 非常強(qiáng),該細(xì)胞需要較低的脈沖電壓。隨著細(xì)胞與壁距離的增加 ( ),毛細(xì)管效應(yīng)迅速減弱,該細(xì)胞需要更高的脈沖電壓。當(dāng)細(xì)胞放置在距毛細(xì)管壁大約兩個(gè)細(xì)胞直徑的距離 ( ) 時(shí),毛細(xì)管效應(yīng)幾乎為零,并且該細(xì)胞需要更高的電壓。
由于毛細(xì)管中的所有細(xì)胞都經(jīng)歷來(lái)自脈沖發(fā)生器的相同電壓脈沖,因此脈沖不可能同樣適用于細(xì)胞的所有三個(gè)區(qū)域。因此,毛細(xì)作用機(jī)制本質(zhì)上是有限的。
毛細(xì)管電泳的局限性:
1)幫助是局部的和不平等的,本質(zhì)上不適合高效率;
2) 氣泡未壓縮,電流擾動(dòng)和飛弧;
3)體積小,使用大容量細(xì)胞樣品不方便,成本高;
4) 低功率脈沖發(fā)生器,不可擴(kuò)展。
2. CeletrixTM 密封管
1>. 用于高效電穿孔的均勻電場(chǎng)。
2>。沒(méi)有比色皿或毛細(xì)管的限制。
3>。樣品體積從小20ul到大800ul的選擇。
4>。快速且經(jīng)濟(jì)高效地處理大樣品。
5>。精度和再現(xiàn)性。
三、CeletrixTM管的優(yōu)點(diǎn)
mRNA超高效電穿孔
許多免疫和研究應(yīng)用需要轉(zhuǎn)染 mRNA。Celetrix 電穿孔技術(shù)可以非常高效地對(duì) mRNA 進(jìn)行電穿孔。
mRNA的轉(zhuǎn)染率通常高于質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染率。例如,GFP mRNA 可以以 97.5% 的超高效率電穿孔到 Jurkat 細(xì)胞。
細(xì)胞中mRNA表達(dá)蛋白的水平比質(zhì)粒表達(dá)的蛋白更均勻。然而,mRNA的蛋白質(zhì)表達(dá)水平通常低于強(qiáng)質(zhì)粒。Celetrix 電穿孔可以幫助實(shí)現(xiàn)相對(duì)較高的蛋白質(zhì)表達(dá)水平和較長(zhǎng)的表達(dá)時(shí)間。
siRNA 電泳比 mRNA 更容易。通常很容易實(shí)現(xiàn)接近 100% 的 siRNA 電穿孔,但蛋白質(zhì)敲低水平是一個(gè)不同的生物學(xué)問(wèn)題,它可能會(huì)根據(jù) siRNA 選擇而有所不同。
此外,mRNA 的轉(zhuǎn)染將有助于一些特殊細(xì)胞,例如在質(zhì)粒電穿孔后往往會(huì)死亡的巨噬細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞系,而不是 mRNA 電穿孔。例如,BFP mRNA 可以以 98.31% 的超高效率電穿孔至 THP-1 細(xì)胞,并且?guī)缀鯖](méi)有細(xì)胞死亡。
Celetrix 優(yōu)勢(shì)
1、 創(chuàng)造性地將所有哺乳動(dòng)物細(xì)胞類型分為兩組,每組只需微調(diào)電壓。操作極其簡(jiǎn)單;
2、高效率和細(xì)胞活力,即使是大質(zhì)粒;
3、低成本:
A.低成本套件;
B.通用試劑盒,無(wú)需為不同的細(xì)胞備貨;
C. 實(shí)驗(yàn)順利,使用的試劑盒較少。
4、誠(chéng)信理念,*“直接轉(zhuǎn)染細(xì)胞核"、“不同細(xì)胞緩沖液"之類的騙局。快速的技術(shù)支持解決用戶的電穿孔問(wèn)題。
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