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Anti-Clostridium difficile Toxin A (Chicken lgY)

艱難梭菌毒素/艱難梭菌是引致抗生素相關性腹瀉和偽膜性結腸炎的病原體。它產生兩種主要毒素，毒素 A 和毒素 B，毒素 A 和毒素 B 都通過氨酸殘基的葡萄糖基化使小 GTP 酶(如 Rho、 Rac 和 Cdc42)失活。這些 gTP 酶的抑制導致信號轉導級聯的停止，從而導致細胞骨架解聚，某些應激激活蛋白激酶的基因轉錄，磷脂酰肌醇4,5二磷酸的合成下降，以及細胞極性可能喪失。細胞骨架結構的喪失導致細胞舍入。一些艱難梭菌菌株也產生二元 ADP- 核糖基化毒素(CDT) ，修飾肌動蛋白。來自艱難梭菌的毒素 a 毒素被稱為腸毒素，分子量為300kDa，等電點 pl 為5.3。毒素 A 已被證明在上皮細胞表面碳水化合物上有結合位點，并引起白細胞介素8的誘導。李斯特提供的艱難梭菌毒素 A 是從天然菌株中高度純化的。產品 # 152艱難梭菌毒素 A 在 Tris 緩沖液中凍干。強烈建議測試一系列毒素濃度的細胞毒性，因為每種細胞對毒素 A 的敏感性不同。來自艱難梭菌的毒素 B 毒素 B，稱為細胞毒素，分子量為270 kDa，pl 為4.1。在組織培養中，毒素 B 是一種對哺乳動物細胞有效的細胞毒素，在細胞舍入測定中，毒素 B 的細胞毒性至少是毒素 A 的1000倍。毒素 B 可以阻斷5-羥色胺的釋放，并刺激磷脂酶 C 和 d 的產生。由于毒素 B 能夠影響細胞骨架的解聚，已經證明它能夠抑制雙相肌肉收縮。毒素 B 具有高度的細胞毒性，對該毒素最敏感的檢測方法是上皮細胞毒性試驗。以細胞為基礎的檢測對于確定住院病人腹瀉病的病因非常重要。這些毒素中和試驗(TNA)與特異性抗體相當精確。如果將特異性抗毒素 B 抗體與糞便樣品混合，保護細胞培養免受沒有該抗體的毒性作用，則確定患者體內存在艱難梭菌毒素 B。名單實驗室的雞肉抗 C。艱難毒素 B 抗體已被證明是有用的這些 TNA 細胞為基礎的測定。李斯特提供的艱難梭菌毒素 B 是從天然菌株中高度純化并作為液體提供的。產品 # 155L 艱難梭菌毒素 B，液體，在 Tris 緩沖溶液中提供。這種毒素溶液很容易使用，并且在某些應用中更加方便。同樣，測試一系列毒素濃度的細胞毒性很重要，因為每種細胞對毒素 B 的敏感性不同。類毒素/艱難梭菌毒素 a 和毒素 b 的類毒素都是由純化的毒素經甲醛滅活而制成的。所有制劑都經過細胞毒性測試，結果在每批貨物提供的 C-A 中。產品 # 153毒素 A 艱難梭菌類毒素在氨酸緩沖液中凍干。產品 # 154毒素 B 艱難梭菌類毒素在氨酸緩沖液中凍干。氨酸脫氫酶(cdgDH)氨酸脫氫酶(cdgDH)是艱難梭菌的天然菌株產生的主要抗原。對于感染早期的診斷，cdGDH 比毒素 A 或毒素 B 更容易被 ELISA 檢測到，并且是開發檢測試劑盒的可行候選者。List Labs 還提供雞抗 cdGDH 抗體，產品 # 756。來自李斯特提供的艱難梭菌的氨酸脫氫酶是從本地菌株中高度純化并作為液體提供的。來自艱難梭菌的產品 # 159氨酸脫氫酶在 D-PBS 緩沖液中進行凍干。抗體列表實驗室提供了幾種針對艱難梭菌產物產生的抗體，包括針對艱難梭菌毒素 A 的山羊抗血清，以及針對艱難梭菌毒素 A 和毒素 B 的親和純化的雞 IgY。還提供了針對艱難梭菌 GDH 和艱難梭菌二元毒素 A 的親和純化的雞 IgY。反 C。艱難二元毒素 B 雞 IgY 既有物素化作用也有非物素化作用。二元毒素 B 亞單位的抗體可用于捕獲和檢測二元毒素。抗艱難梭菌產物的抗體可用于免疫印跡、 ELISA 和夾心 ELISA。這些產品可能適用于診斷，并對傳染病研究有相當大的興趣。產品 # 752抗 C。艱難毒素 A 山羊抗血清作為凍干粉末提供。產品 # 753反 C。艱難毒素 A 親和純化的雞 IgY 作為液體在 PBS 緩沖液中提供。產品 # 754反 C。艱難毒素 B 親和純化的雞 IgY 作為液體在 PBS 緩沖液中提供。產品 # 756抗 C。難氨酸脫氫酶親和純化的雞 IgY 在 PBS 緩沖液中作為液體提供。產品 # 757反 C。艱難二元毒素 A 亞基親和純化的雞 IgY 作為液體在 PBS 緩沖液中提供。產品 # 758反 C。艱難二元毒素 B 亞基親和純化的雞 IgY 在 PBS 緩沖液中作為液體提供。產品 # 759反 C。艱難二元毒素 B 亞基雞 IgY，物素化，作為液體在 PBS 緩沖液中提供。

科學報告鑒定出 ADS024，一種具有直接殺死艱難梭菌和毒素降解生物活性的新特征菌株。 O’Donnell，MM; Hegarty，jW; Healy，b; Schulz，S; Walsh，CJ; Hill，c; Ross，RP; Rea，MC; Farquhar，R; Chesnel，L; 艱難梭菌感染(CDI)仍然是全球重大的健康威脅。艱難梭菌是一種機會性的毒性病原體，它利用腸道微生物群的紊亂生長，產生從腹瀉到偽膜性結腸炎等癥狀和體征。用于治療艱難梭菌感染的抗生素通常是廣譜的，可以進一步破壞共生腸道微生物群，使患者易于復發艱難梭菌感染。在抗生素治療完成后，繼續抑制艱難梭菌生長的治療方案的需求日益增加。降解艱難梭菌毒素同時對腸道細菌的附帶影響最小的治療也需要防止復發。能夠產生一系列抗菌化合物、蛋白酶和其他生物活性代謝物的治療性細菌是在癥狀消退后預防 CDI 復發的潛在有力工具。在這里，我們描述了 ADS024(以前的 ART24)的鑒定和初始角色塑造，這是一種新的治療細菌，可以在體外殺死艱難梭菌，對其他共生細菌的影響有限。除了直接殺死艱難梭菌，ADS024還能產生能夠降解艱難梭菌毒素的蛋白酶，這種蛋白酶是與大多數 CDI 病例相關的癥狀的驅動因素。ADS024作為一種單菌株活性生物治療產品正在臨床開發中，用于預防 CDI 復發，這個初始數據集支持進一步的研究，旨在在未來的人類臨床試驗中評估 ADS024。

CellTFPI 是來自強毒力進化枝2艱難梭菌 J; Yang，Q; Zhang，X; Zhang，Y; Wan，L; Chan，X; Zhou，Y; He，L; Li，D; Jin，D; zen，Y; Huang，J; Li，Y; Tao，L; 強毒力進化枝2艱難梭菌的出現與嚴重癥狀有關，占全球感染的 > 20% 。TcdB 是艱難梭菌的主要毒力因子，而進化枝2菌株僅表達兩種使用不同于經典 TcdB 的未知受體的 TcdB 變體(TcdB2和 TcdB4)。在這里，我們進行了 CRISPR/Cas9篩選 TcdB4和鑒定組織因子途徑抑制劑(TFPI)作為其受體。使用低溫電鏡，我們確定了全長 TcdB4與 TFPI 的復雜結構，為 TcdB 定義了一個共同的受體結合區域。該區域內的殘基變異將主要的 TcdB 變異分為兩類: 一類識別卷曲(FZD) ，另一類識別 TFPI。TFPI 在腸腺中高度表達，重組 TFPI 對結腸上皮具有保護作用。這些發現確定了 TFPI 作為來自艱難進化枝2 C 的 TcdB 的結腸隱窩受體，并揭示了 CDI 發病的新機制。

方法在使用下一代 DNA 測序的單結構域抗體的分子生物學簡易親和力成熟中，Lowden，MJ; van Faassen，H; Raphael，S; Ryan，S; Hussack，G; Henry，KA; 結合親和力是抗體功能的主要決定因素之一。在這里，我們提供了一個簡單和快速親和力成熟的單結構域抗體(sdAbs)使用串聯噬菌體展示選擇和下一代 DNA 測序的方案。使用隨機或位點飽和誘變使針對艱難梭菌毒素 A (A26.8)的模型駝科植物 sdAb 的序列多樣化，并克隆到基因3上游的噬菌體載體中。所得到的噬菌體展示的 sdAb 文庫對艱難梭菌毒素 A 進行平移，并使用 Illumina MiSeq 測序對平移輸出進行詢問。通過生物信息學分析，我們能夠鑒定 sdAb 互補決定區域中的個體親和力增強氨基酸取代，當結合時，導致親和力改善約10倍。這種方法的優點是不需要對單個克隆進行廣泛的篩選和角色塑造，也不需要關于 sdAb 的機制的結構信息: 抗原相互作用。

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